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去乙?;碧侵锉砻婊钚詣┑慕Y(jié)構(gòu)鑒定、理化性質(zhì)及應(yīng)用(二)
來源:應(yīng)用化學(xué) 瀏覽 610 次 發(fā)布時(shí)間:2025-02-13
1實(shí)驗(yàn)部分
1.1儀器和試劑
1290 HPLC-Bruker Maxis Q-TOF型高效液相色譜-高分辨串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀(HPLC-MS/MS,美國Agilent公司);LC-WB-4型磁力攪拌水浴鍋(上海力辰邦西儀器科技有限公司);JZ-200A型自動(dòng)界面張力儀(芬蘭Kibron公司);Foamscan型全自動(dòng)泡沫分析儀(法國Teclis公司)。
SLs產(chǎn)品:野生型菌株生產(chǎn)的SLs產(chǎn)品是以葡萄糖和油酸為底物,經(jīng)發(fā)酵后自然沉淀得到系列同系物,大部分具有乙?;?,簡(jiǎn)稱為“乙?;疭Ls”;去乙酰化菌株生產(chǎn)的SLs產(chǎn)品是以葡萄糖和油酸為底物,經(jīng)發(fā)酵后使用乙醇萃取,在55℃減壓去除乙醇溶劑后得到,簡(jiǎn)稱為“去乙?;疭Ls”。
乙酸乙酯、無水乙醇、硫酸、甲酸、無水碳酸鈉、連二硫酸鈉、無水氯化鈣、氯化鈉和液體石蠟均為分析純?cè)噭?,氫氧化鈉和硫化鈉為化學(xué)純?cè)噭?,以上試劑均購自國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;松節(jié)油和棉籽油為分析純?cè)噭?,購自上海邁瑞爾生化科技有限公司。
1.2乙?;疭Ls和去乙?;疭Ls同系物的結(jié)構(gòu)鑒定
HPLC-MS/MS的色譜柱為Waters ACQUITY UPLC BEH130 C18 2.1 mm×150 mm×1.7μm。實(shí)驗(yàn)條件:流動(dòng)相A:0.1%甲酸、1%乙腈水溶液;流動(dòng)相B:0.1%甲酸乙腈;流速為0.2 mL/min;等度洗脫條件為:80%B。柱溫:30℃,進(jìn)樣量:1μL,UV檢測(cè)波長(zhǎng):207 nm,無分流進(jìn)入質(zhì)譜。質(zhì)譜:電噴霧正離子模式;掃描范圍m/z 200~1000;毛細(xì)管電壓:4.5 kV;噴霧氣壓1.03×104 Pa;干燥氣(N2)流速:6 L/min;氣體溫度:180℃;分辨率:50000。
1.3理化性能測(cè)試方法
1.3.1溶解性、濁點(diǎn)和耐酸堿性
溶解度測(cè)定:量取100 mL去離子水于燒杯中,逐步加入溶質(zhì)其中至恰好飽和,計(jì)算濃度。濁點(diǎn)的測(cè)定參考GB/T 5559-2010。耐酸堿性檢測(cè)方法參考GB/T 5555-2003和GB/T 5556-2003,抗硬水性測(cè)試參考GB/T 7381-2010。
1.3.2表面性能
通過鉑環(huán)法在室溫下進(jìn)行表面張力測(cè)定,參考GB/T 5549-2010。繪制出表面張力-濃度對(duì)數(shù)(γ-lg c)曲線。使用公式(1)和(2)對(duì)飽和吸附量(Гmax)和單個(gè)分子占據(jù)最小表面積(Amin)進(jìn)行計(jì)算。
式中,Гmax是飽和吸附量(μmol/m2);γ為表面張力(mN/m);R為摩爾氣體常數(shù)(8.314 J/(mol·K));T為熱力學(xué)溫度(K);ρ為表面活性劑的質(zhì)量濃度(mg/L);(?γ/?logρ)T是表面張力與濃度對(duì)數(shù)關(guān)系曲線的斜率;Amin是單個(gè)分子占有的最小表面積(nm2);NA為阿伏伽德羅常數(shù)(6.022×1023/mol)。
1.3.3親水-親油平衡值
采用乳化法來測(cè)定HLB值,即通過觀測(cè)樣品對(duì)確定HLB值的混合植物油的乳化穩(wěn)定性來評(píng)價(jià)樣品的HLB值。具體方法為:使用松節(jié)油(HLB值為16)和棉籽油(HLB值為6)配制一系列不同HLB值的油相,每19份油相中加入80份水和1份待測(cè)樣品,攪拌乳化,穩(wěn)定10 min后讀取乳化層高度,乳化層高度最高的試樣中對(duì)應(yīng)油相的HLB值即為待測(cè)試樣的HLB值。
1.3.4泡沫性能
使用泡沫分析儀通過多孔介質(zhì)向400 mL待測(cè)液體(1 g/L)內(nèi)注入氣體而產(chǎn)生泡沫,記錄2種SLs起泡后穩(wěn)定30 s和5 min的泡沫量,使用公式(3)計(jì)算2種SLs的泡沫穩(wěn)定性:
式中,Sfoam為泡沫穩(wěn)定性,V5 min為靜置5 min后的泡沫體積(mL),V30 s為靜置30 s后的泡沫體積(mL)。為了對(duì)比分析SLs在不同鹽度(S)下的泡沫性能,在氯化鈉質(zhì)量濃度為0、10、100、200、400、600、800和1000 mg/L的溶液中測(cè)定30 s泡沫量,方法同上。
1.3.5乳化性能
取40 mL待測(cè)溶液(1 g/L)、40 mL液體石蠟,加入到100 mL具塞量筒中,劇烈搖動(dòng)后開始計(jì)時(shí),記錄分出10 mL水相所用時(shí)間。